Fenilgalaktozīds CAS: 2818-58-8

Ietekme uz enzīmu aktivitāti: Fenilgalaktozīdu parasti izmanto, lai mērītu enzīma β-galaktozidāzes aktivitāti. Kad fenilgalaktozīdu hidrolizē β-galaktozidāze, tas atbrīvo p-nitrofenolu. P-nitrofenola uzkrāšanos var kvantitatīvi izmērīt, sniedzot ieskatu β-galaktozidāzes aktivitātē. Šo efektu izmanto tādās lietojumprogrammās kā enzīmu testi un skrīninga sistēmas.

Gēnu ekspresijas analīze: Fenilgalaktozīdu bieži izmanto kā substrātu molekulārās bioloģijas eksperimentos, lai pētītu gēnu ekspresiju. LacZ gēns, kas kodē β-galaktozidāzi, parasti tiek sapludināts ar citu interesējošu gēnu regulatoriskajām sekvencēm. LacZ gēna ekspresija un fenilgalaktozīda hidrolīze ar β-galaktozidāzi var norādīt uz pētāmā mērķa gēna ekspresijas modeli un līmeni.

Skrīninga sistēmas: Fenilgalaktozīds ir svarīga skrīninga sistēmu sastāvdaļa, kas izmanto β-galaktozidāzes aktivitāti. Viens plaši pazīstams piemērs ir zili baltā skrīninga metode, ko izmanto, lai identificētu rekombinantās vai transformētās šūnas molekulārās bioloģijas eksperimentos. Kolonijas, kas ir veiksmīgi uzņēmušas rekombinanto DNS vai ir pakļautas ģenētiskai rekombinācijai, ekspresēs β-galaktozidāzi, izraisot fenilgalaktozīda hidrolīzi un zilas krāsas veidošanos.

Olbaltumvielu attīrīšana: Dažos gadījumos fenilgalaktozīdu var izmantot kā ligandu afinitātes hromatogrāfijā, lai attīrītu olbaltumvielas, kas specifiski saistās ar β-galaktozidāzi vai tiek aktivizētas ar to. Interesējošajam proteīnam var būt afinitātes marķieris vai saplūšanas marķieris, kas satur β-galaktozidāzi saistošu domēnu. Izlaižot olbaltumvielu maisījumu caur kolonnu ar imobilizētu fenilgalaktozīdu, vēlamo olbaltumvielu var selektīvi saglabāt un pēc tam eluēt.