Fenilgalaktozīds CAS:2818-58-8

Ietekme uz enzīmu aktivitāti: fenilgalaktozīdu parasti izmanto, lai noteiktu enzīma β-galaktozidāzes aktivitāti.Kad fenilgalaktozīdu hidrolizē β-galaktozidāze, tas atbrīvo p-nitrofenolu.P-nitrofenola uzkrāšanos var kvantitatīvi izmērīt, sniedzot ieskatu β-galaktozidāzes aktivitātē.Šis efekts tiek izmantots tādos lietojumos kā enzīmu testi un skrīninga sistēmas.

Gēnu ekspresijas analīze: Fenilgalaktozīdu bieži izmanto kā substrātu molekulārās bioloģijas eksperimentos, lai pētītu gēnu ekspresiju.LacZ gēns, kas kodē β-galaktozidāzi, parasti tiek sapludināts ar citu interesējošo gēnu regulējošām sekvencēm.LacZ gēna ekspresija un fenilgalaktozīda hidrolīze ar β-galaktozidāzes palīdzību var norādīt uz pētāmā mērķa gēna ekspresijas modeli un līmeni.

Skrīninga sistēmas: Fenilgalaktozīds ir svarīga skrīninga sistēmu sastāvdaļa, kas izmanto β-galaktozidāzes aktivitāti.Viens plaši pazīstams piemērs ir zili baltā skrīninga metode, ko izmanto, lai identificētu rekombinantās vai pārveidotās šūnas molekulārās bioloģijas eksperimentos.Kolonijas, kuras ir veiksmīgi uzņēmušas rekombinanto DNS vai ģenētiski rekombinētas, ekspresēs β-galaktozidāzi, izraisot fenilgalaktozīda hidrolīzi un zilas krāsas veidošanos.

Olbaltumvielu attīrīšana: dažos gadījumos fenilgalaktozīdu var izmantot kā ligandu afinitātes hromatogrāfijai, lai attīrītu proteīnus, kas specifiski saistās ar β-galaktozidāzi vai tiek aktivizēti ar to.Interesējošajam proteīnam var būt afinitātes marķējums vai saplūšanas marķējums, kas satur β-galaktozidāzi saistošu domēnu.Izlaižot olbaltumvielu maisījumu caur kolonnu ar imobilizētu fenilgalaktozīdu, vēlamo proteīnu var selektīvi saglabāt un pēc tam eluēt.