5-brom-4-hlor-3-indolil-beta-D-glikuronīda cikloheksilamonija sāls CAS: 18656-96-7

5-brom-4-hlor-3-indolil-beta-D-glikuronīda cikloheksilamonija sāls (X-glikuronīda) iedarbība ir tā spēja veidot zilas nogulsnes vai mainīt krāsu enzīma beta-D-glikuronidāzes klātbūtnē. Šī fermentatīvā reakcija notiek, kad beta-D-glikuronidāze sašķeļ glikozīdisko saiti starp indola grupu un glikuronskābes daļu.

X-glikuronīdu galvenokārt izmanto molekulārās bioloģijas un enzimoloģijas eksperimentos. To parasti izmanto kā substrātu beta-D-glikuronidāzes aktivitātes noteikšanai. Daži specifiski pielietojumi ietver:

Reportergēnu testi: X-glikuronīdu bieži izmanto kā substrātu reportergēnu testos, kur beta-D-glikuronidāze tiek izmantota kā reportiera enzīms. Sapludinot interesējošā gēna promotera reģionu vai kodējošo secību ar beta-D-glikuronidāzes gēnu, pētnieki var izmērīt gēna ekspresiju vai aktivitāti, uzraugot zilu nogulšņu veidošanos vai krāsas izmaiņas, pievienojot X-glikuronīdu.

Baktēriju un rauga transformācijas testi: X-glikuronīdu var izmantot, lai noteiktu veiksmīgu baktēriju vai rauga transformāciju ar vektoru, kas satur beta-D-glikuronidāzes gēnu. Transformētās šūnas, kas ekspresē enzīmu, var hidrolizēt X-glikuronīdu, radot redzamas krāsas izmaiņas vai nogulsnes.

Histoķīmiskā krāsošana: X-glikuronīds tiek izmantots histoķīmiskās krāsošanas metodēs, lai vizualizētu beta-D-glikuronidāzes aktivitātes klātbūtni un sadalījumu audos vai šūnās. Šī krāsošana ļauj lokalizēt un identificēt šūnas, kas ekspresē enzīmu.