IPTG CAS:367-93-1 Ražotāja cena
Izopropil-β-D-1-tiogalaktopiranozīds (IPTG) ir sintētisks laktozes analogs, ko parasti izmanto molekulārās bioloģijas pētījumos un biotehnoloģiju pielietojumos.IPTG galvenokārt izmanto, lai izraisītu gēnu ekspresiju baktēriju sistēmās, kur tas kalpo kā molekulārs trigeris, lai uzsāktu mērķa gēnu transkripciju.
Pievienojot augšanas barotnei, baktērijas uzņem IPTG un var saistīties ar lac represora proteīnu, neļaujot tam bloķēt lac operona aktivitāti.Lac operons ir gēnu kopums, kas iesaistīts laktozes metabolismā, un, kad tiek noņemts represora proteīns, gēni tiek ekspresēti.
IPTG bieži izmanto kopā ar lacUV5 mutanta promotoru, kas ir konstitutīvi aktīva lac promotora versija.Apvienojot IPTG indukciju ar šo mutanta promotoru, pētnieki var sasniegt augstu gēnu ekspresijas līmeni.Tas ļauj ražot lielu daudzumu olbaltumvielu attīrīšanai vai citiem pakārtotiem lietojumiem.
Papildus gēnu ekspresijai IPTG bieži izmanto arī zilās/baltās skrīninga pārbaudēs.Šajā tehnikā lacZ gēns parasti tiek sapludināts ar interesējošo gēnu, un baktērijas, kas veiksmīgi ekspresē šo saplūšanas gēnu, ražos aktīvu β-galaktozidāzes enzīmu.Ja IPTG tiek pievienots kopā ar hromogēnu substrātu, piemēram, X-gal, baktērijas, kas ekspresē saplūšanas gēnu, kļūst zilas β-galaktozidāzes aktivitātes dēļ.Tas ļauj identificēt un atlasīt rekombinantos celmus, kas ir veiksmīgi integrējuši interesējošo gēnu.
Gēnu ekspresijas indukcija: IPTG parasti izmanto, lai izraisītu mērķa gēnu ekspresiju baktēriju sistēmās.Tas atdarina dabisko laktozes induktors un saistās ar lac represora proteīnu, neļaujot tam bloķēt lac operonu.Tas nodrošina vēlamo gēnu transkripciju un ekspresiju.
Olbaltumvielu ekspresija un attīrīšana: IPTG indukciju bieži izmanto, lai ražotu lielu daudzumu rekombinanto proteīnu dažādiem mērķiem, piemēram, bioķīmiskiem pētījumiem, terapeitiskai ražošanai vai strukturālai analīzei.Izmantojot atbilstošus ekspresijas vektorus un IPTG indukciju, pētnieki var sasniegt augstu mērķa proteīna ražošanas līmeni baktēriju saimniekos.
Zilā/baltā skrīnings: zilā/baltā skrīninga testos IPTG bieži izmanto kombinācijā ar lacZ gēnu un hromogēnu substrātu, piemēram, X-gal.LacZ gēns parasti ir sapludināts ar interesējošo gēnu, un baktērijas, kas veiksmīgi ekspresē šo saplūšanas gēnu, ražos aktīvu β-galaktozidāzes enzīmu.Pievienojot IPTG un hromogēno substrātu, rekombinantie celmi, kas ekspresē saplūšanas gēnu, kļūst zili, ļaujot viegli identificēt un atlasīt.
Gēnu regulēšanas pētījums: IPTG indukciju parasti izmanto pētījumos, lai pētītu gēnu un operonu, īpaši lac operona, regulēšanu.Manipulējot ar IPTG koncentrācijām un uzraugot lac operona komponentu ekspresiju, pētnieki var izpētīt gēnu regulēšanas mehānismus un dažādu faktoru vai mutāciju lomu.
Gēnu ekspresijas sistēmas: IPTG ir būtiska sastāvdaļa vairākās gēnu ekspresijas sistēmās, piemēram, sistēmās, kuru pamatā ir T7 promotors.Šajās sistēmās lac promotoru bieži izmanto, lai vadītu T7 RNS polimerāzes ekspresiju, kas, savukārt, transkribē mērķa gēnus T7 promotora sekvenču kontrolē.IPTG izmanto, lai izraisītu T7 RNS polimerāzes ekspresiju, izraisot mērķa gēna ekspresijas aktivizēšanu.
| Sastāvs | C9H18O5S |
| Pārbaude | 99% |
| Izskats | Balts pulveris |
| CAS Nr. | 367-93-1 |
| Iepakošana | Mazs un apjomīgs |
| Glabāšanas laiks | 2 gadi |
| Uzglabāšana | Uzglabāt vēsā un sausā vietā |
| Sertifikācija | ISO. |
